Aloysia Weber rođena je u Zell im Wiesentalu, u regiji Schwarzwald u Njemačkoj, 12. studenog 1760. Njezin otac, Fridolin Weber, bio je glazbenik i učitelj glazbe, a njezina majka, Cäcilia Weber, bila je pjevačica. Aloysia je rano pokazala talent za glazbu, te je počela učiti klavir i glas sa svojim ocem.
Godine 1777. Aloysia i njezina obitelj preselili su se u München, gdje je debitirala na pozornici u dobi od 17 godina. Ubrzo je postala uspješna operna pjevačica, nastupajući u glavnim ulogama u operama Mozarta, Glucka i drugih skladatelja.
Godine 1780. Aloysia je upoznala Wolfganga Amadeusa Mozarta, koji je tada živio u Münchenu. Mozart je odmah bio opčinjen Aloysiom, te je za nju skladao nekoliko arija. Njih su dvoje bili zaručeni, ali su zaruke raskinute 1781.
Aloysia je nastavila uspješno nastupati kao operna pjevačica sve do 1790., kada se povukla s pozornice. Udala se za Josepha Langea, dvorskog glazbenika, 1795. Par je imao dvoje djece, sina i kćer.
Nakon umirovljenja Aloysia Weber posvetila se glazbenom podučavanju. Podučavala je klavir i glas učenicima svih uzrasta, a bila je i cijenjena profesorica glazbe u Beču dugi niz godina. Umrla je u Beču 1839.