Glavne uloge:
* Phineas Flynn: Inventivan, energičan stariji brat. Glas Vincent Martella.
* Ferb Fletcher: Tihi, snalažljivi mlađi brat. Glas Thomasa Sangstera.
* Candace Flynn: Njihova starija sestra koja je opsjednuta time da ih uhapsi zbog njihovih ludih izuma. Glas Ashley Tisdale.
* Perry the Platypus: Phineasov i Ferbov ljubimac kljunar, koji potajno radi kao tajni agent za O.W.C.A. (Organizacija bez cool akronima). Glas Dee Bradley Baker.
* Dr. Heinz Doofenshmirtz: Zli znanstvenik koji živi preko puta, neprestano pokušava zauzeti Tri-State Area. Glas Dan Povenmirea.
* Isabella Garcia-Shapiro: Phineasova simpatija, članica Fireside Girls. Glas Alyson Stoner.
* Buford Van Stomm: Čvrst i pomalo glup nasilnik. Glas Bobbyja Gaylora.
* Baljeet Tjinder: Phineasov i Ferbov inteligentan i često nervozan prijatelj. Glas Maulika Pancholyja.
* Jeremy Johnson: Candaceina simpatija, popularan dečko. Glas Mitchela Mussoa.
* Mama Phineasa i Ferba: Majka puna ljubavi i puna podrške. Glas Caroline Rhea.
* Tata Phineasa i Ferba: Opušten i često nesvjestan otac. Glas Richarda O'Briena.
Likovi koji se ponavljaju:
* Veliki monogram: Perryjev šef u O.W.C.A. Glas Jeffa "Swampyja" Marsha.
* Agent P: Kodno ime Perryjevog tajnog agenta.
* Stacy Hirano: Candaceina najbolja prijateljica, koja je često skeptična prema Candaceinim pokušajima da uhapsi Phineasa i Ferba. Glas Kelly Hu.
* The Fireside Girls: Grupa djevojaka koje su uvijek željne pomoći Phineasu i Ferbu. Glas Alyson Stoner, Ashley Tisdale i drugih.
* The Evil Sidekick: Doofenshmirtzov nespretni pomoćnik. Glas Dee Bradley Baker.
* Vanessa Doofenshmirtz: Doofenshmirtzova kći tinejdžerica, kojoj je obično neugodno zbog očevih zlotvora. Glas Olivije Olson.
* Norma: Doofenshmirtzov robot batler.
* Pripovjedač: Tajanstveni glas koji pripovijeda mnoge epizode. Glas Dee Bradley Baker.
Ovaj popis pokriva većinu glavnih likova, ali Phineas i Ferb poznati su po velikom glumačkom ansamblu i mnogim likovima koji se ponavljaju, tako da postoji još mnogo likova koji bi se mogli nabrojati!