MIDI datoteke ne sadrže stvarne podatke o zvuku, već skup naredbi koje određuju koje note, instrumente i druge parametre treba svirati. Te su datoteke relativno male u usporedbi s audio datotekama jer pohranjuju samo informacije o izvedbi, a ne stvarne audio uzorke.
MIDI datoteke mogu se koristiti za stvaranje i uređivanje glazbe pomoću MIDI-kompatibilnog softvera, kao što su digitalne audio radne stanice (DAW). Također se mogu reproducirati na hardverskim sintesajzerima i samplerima koji podržavaju MIDI. Dodatno, MIDI datoteke se koriste u nizu drugih aplikacija, kao što su video igre i obrazovni softver.
Jedna od prednosti MIDI datoteka je ta što se mogu lako mijenjati i uređivati. To omogućuje glazbenicima stvaranje i eksperimentiranje s različitim zvukovima i aranžmanima bez potrebe za ponovnim snimanjem audio podataka. Oni također nude fleksibilnost u pogledu instrumenata koji se koriste, budući da se ista MIDI datoteka može reproducirati na različitim sintisajzerima ili semplerima, pri čemu svaki proizvodi svoju jedinstvenu interpretaciju glazbe.
Međutim, MIDI datoteke ne hvataju punu izražajnost i nijanse stvarne audio snimke. Kvaliteta i realističnost zvuka proizvedenog iz MIDI datoteka ovisi o kvaliteti MIDI sintesajzera ili uzorkovatelja koji se koristi za njihovu reprodukciju. Osim toga, MIDI datoteke ne sadrže informacije o miksu, efektima ili drugim elementima audiotehnike koji mogu biti prisutni u audio datoteci.
Općenito, MIDI datoteke su svestran format za stvaranje, uređivanje i reprodukciju glazbe u digitalnom okruženju. Oni nude fleksibilnost i jednostavnost modifikacije i naširoko se koriste u glazbenoj produkciji i raznim digitalnim medijskim aplikacijama.